Instruções para preparo de amostras para UPLC
Segundo o preparo, as amostras podem ser divididas em duas classes (dada a sensibilidade do equipamento, as amostras precisam ser extremamente diluídas):
- Amostras de extratos brutos, que são complexas (ou seja, possuem dezenas ou até centenas de compostos), são preparadas numa concentração de aproximadamente 1 mg/ml.
- Amostras de compostos puros (produtos de síntese, padrões, extratos simples ou com 1 ou 2 compostos majoritários) são preparadas numa concentração de aproximadamente 10 μg/ml.
Caso a quantidade de componentes seja desconhecida, sugere-se iniciar pela mais diluída (por infusão direta) e, caso necessário, deve-se aumentar a concentração.
Deve-se a utilizar solventes de grau HPLC no preparo das amostras.
Ainda, após o preparo da amostra, esta deve ser filtrada em filtro de no mínimo 0,45 μm.
Deve-se atentar para a utilização de filtros adequados e que resistam a solventes orgânicos, visto que uma das maiores fontes de contaminações em MS são polímeros que, além de sujar o equipamento, podem atrapalhar as análises. Esse processo é necessário para evitar entupimento da coluna e do sistema UPLC. A solubilidade do analito deve ser compatível com o solvente utilizado na análise.